LETM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406163

概要

LETM1（leucine zipper EF-hand containing transmembrane protein 1）はミトコンドリア内膜に局在するタンパク質で、ミトコンドリアのイオン恒常性および生体エネルギー制御に関与しています。ミトコンドリア形態やクリステ構造の維持、ならびにイオン輸送と酸化的リン酸化の共役の調節に寄与し、LETM1の活性は細胞のエネルギー代謝やストレス応答と結び付けられています。LETM1の量的変化は神経発達に関わる表現型やミトコンドリア機能不全と関連することが報告されており、腫瘍細胞の代謝や増殖との関連でもその制御異常が検討されています。ミトコンドリア調節因子として、LETM1はアポトーシス感受性、活性酸素種（ROS）シグナル、代謝経路の再編成への影響という観点からも頻繁に研究されています。

LETM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLETM1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LETM1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LETM1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LETM1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LETM1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LETM1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LETM1の機能に不可欠なLETM1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LETM1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LETM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLETM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LETM1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LETM1 HDRプラスミド（h）および LETM1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLETM1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLETM1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。