LEREPO4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427290

Visão geral

Zc3h15 codifica a proteína murina LEREPO4, um fator de ligação a RNA do tipo dedo de zinco previsto, implicado na regulação gênica pós-transcricional, incluindo o controle da estabilidade, do processamento e da tradução de mRNAs. Ao determinar o destino dos RNAs, Zc3h15 está em posição de influenciar resultados transcricionais dependentes de sinalização e programas celulares como proliferação, diferenciação e respostas ao estresse. A desregulação de proteínas ligadoras de RNA e de complexos ribonucleoproteicos associados é amplamente relacionada a alterações na sinalização imune e a fenótipos oncogênicos, tornando Zc3h15 um ponto relevante para estudos mecanísticos do controle da expressão gênica. Em sistemas de modelos murinos, a perturbação de Zc3h15 pode ser usada para investigar como a regulação centrada em RNA modula a atividade de vias e transições de estado celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LEREPO4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zc3h15 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zc3h15, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zc3h15 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LEREPO4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zc3h15 para a investigação da sinalização de LEREPO4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zc3h15 críticos para a função LEREPO4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zc3h15 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LEREPO4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LEREPO4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zc3h15. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LEREPO4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LEREPO4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zc3h15 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zc3h15 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.