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LDH-B双切口酶质粒(h) | sc-416429-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LDH-B双切口酶质粒(h2) | sc-416429-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LDHB 编码乳酸脱氢酶的 LDH-B(LDH-1)亚基。乳酸脱氢酶是一种位于细胞质的酶,可催化丙酮酸与乳酸之间的可逆转化,并伴随 NADH 与 NAD⁺ 的相互转变。通过调控丙酮酸–乳酸通量,LDH-B 有助于协调糖酵解与线粒体氧化代谢,并在氧气与营养条件变化时维持细胞氧化还原稳态。LDHB 活性常在代谢重编程背景下被研究,包括乳酸利用方式以及 NAD⁺/NADH 平衡的改变,这些变化会影响生物合成能力与应激反应。LDHB 表达改变及 LDH 同工酶组成的变化,与多种疾病相关模型中观察到的代谢表型有关,包括肿瘤生物学以及中间代谢遗传性疾病等。
LDH-B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LDHB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LDHB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LDHB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LDHB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。