非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
LAT1双切口酶质粒(h): sc-401609-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- LAT1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- LAT1双切酶质粒（h）和LAT1双切酶质粒（h2）编码针对SLC7A5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：LAT1: sc-374232，通过WB, IF或者IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
LAT1双切口酶质粒(h) | sc-401609-NIC | 20 µg | $410.00 |
SLC7A5 编码 L 型氨基酸转运体 1（LAT1）。LAT1 属于不依赖钠离子的系统 L 转运体，可与 SLC3A2（CD98hc）形成异源二聚体，介导亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸等大体积中性必需氨基酸的摄取。通过调控细胞内氨基酸的可用性，LAT1 影响包括 mTORC1 信号传导、翻译调控以及细胞代谢适应在内的营养感知程序。LAT1 的活性通过将氨基酸转运与氧化还原与生物能量需求相耦联，支持细胞的增殖与应激反应状态，并将膜转运与生长因子及致癌信号网络联系起来。SLC7A5 表达及氨基酸转运能力的改变，与癌症生物学中的代谢失衡相关；同时也与神经发育和神经系统表型相关，在这些情形下，氨基酸通量会影响神经递质前体以及细胞稳态。
LAT1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SLC7A5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLC7A5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SLC7A5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SLC7A5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。