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Laminin γ-2双切口酶质粒(h) | sc-401068-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Laminin γ-2双切口酶质粒(h2) | sc-401068-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LAMC2 编码层粘连蛋白 γ2(laminin γ2),它是基底膜中层粘连蛋白-332(laminin-332)的关键亚基,通过与整合素及其他细胞外基质受体相互作用,支持上皮细胞的黏附、极性建立与迁移。Laminin γ2 参与半桥粒(hemidesmosome)的组织以及基质重塑,并协调通过黏着斑、PI3K–AKT 和 MAPK 通路的信号传导,从而影响细胞骨架动态与细胞存活。LAMC2 表达或 laminin-332 结构的改变与表皮完整性受损和异常的上皮–间质相互作用相关,并在组织损伤与上皮不典型增生等情境中受到研究。作为与 ECM 相关、决定屏障功能与运动能力的因素,LAMC2 常在侵袭、创伤再上皮化以及细胞外基质信号传导的模型中被重点研究。
Laminin γ-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LAMC2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LAMC2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LAMC2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LAMC2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。