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Laminin γ-1双切口酶质粒(h) | sc-401029-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Laminin γ-1双切口酶质粒(h2) | sc-401029-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LAMC1 编码层粘连蛋白(laminin)γ1 链,是多种基底膜 laminin 三聚体的核心组成部分,这些三聚体共同组织细胞外基质结构,并调控细胞黏附、迁移与极性。通过与整合素(integrins)、肌营养不良蛋白聚糖(dystroglycan)及其他基质受体相互作用,laminin γ1 可调节黏着斑(focal adhesion)动态及其下游信号通路,例如影响细胞存活与分化的 FAK/SRC、PI3K–AKT 和 MAPK 通路。依赖 LAMC1 的基底膜组装对于组织形态发生、上皮完整性以及血管与神经肌肉结构的组织至关重要。laminin 网络及 LAMC1 相关信号的失调与纤维化、肿瘤细胞侵袭等研究密切相关,这些病理过程中常见基底膜重塑以及细胞—基质通讯改变。
Laminin γ-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LAMC1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LAMC1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LAMC1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LAMC1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。