L-Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401836

Visão geral

MYCL codifica a L-Myc, um fator de transcrição básico do tipo hélice–alça–hélice com zíper de leucina (bHLH-LZ) da família MYC, que forma heterodímeros com MAX para regular a expressão gênica dirigida pela RNA polimerase II. A L-Myc influencia a progressão do ciclo celular, a biogênese de ribossomos, a reprogramação metabólica e o controle transcricional associado à cromatina, integrando sinais entre programas de proliferação e diferenciação. A atividade de MYCL se cruza com a dinâmica da rede MYC/MAX e pode modular a transcrição dependente de E2F e respostas de estresse apoptótico, dependendo do contexto celular. A desregulação ou amplificação de MYCL está ligada a programas transcricionais oncogênicos em tipos tumorais específicos, tornando-o um nó útil para estudar o controle de crescimento associado à linhagem e os circuitos de fatores de transcrição.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO L-Myc (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYCL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYCL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYCL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína L-Myc.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYCL para a investigação da sinalização de L-Myc, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYCL críticos para a função L-Myc
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYCL para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo L-Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo L-Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYCL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo L-Myc Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR L-Myc (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYCL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYCL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.