KV3.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406541
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KV3.1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KV3.1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KV3.1 Anticorpo (E-2): sc-514554
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KV3.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406541 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KCNC1 codifica a subunidade do canal de potássio dependente de voltagem KV3.1, uma condutância de K⁺ de ativação rápida e desativação igualmente rápida, que sustenta potenciais de ação breves e disparo em alta frequência em células excitáveis. KV3.1 molda a repolarização da membrana e a precisão do disparo, influenciando oscilações de rede e o timing sináptico por meio da regulação da excitabilidade neuronal. A atividade de KCNC1 se cruza com processos mais amplos de sinalização de canais iônicos que coordenam o influxo de cálcio, a probabilidade de liberação de neurotransmissores e a adaptação da frequência de disparo. Variações genéticas ou desregulação de KCNC1 têm sido associadas a fenótipos neurológicos que envolvem excitabilidade alterada, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de canalopatias e disfunção de circuitos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KV3.1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KV3.1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNC1 para a investigação da sinalização de KV3.1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNC1 críticos para a função KV3.1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNC1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KV3.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KV3.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KV3.1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KV3.1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.