KV1.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403806
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KV1.1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KV1.1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KV1.1 Anticorpo (2D8): sc-293345
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KV1.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403806 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KCNA1 codifica a subunidade humana do canal de potássio dependente de voltagem KV1.1, um componente formador de poro que contribui para as correntes de K+ do tipo retificador tardio e determina a excitabilidade da membrana. O KV1.1 influencia a repolarização do potencial de ação, a frequência de disparo e a transmissão sináptica, ligando a atividade do canal à sinalização neuronal e à estabilidade das redes neurais. Ao controlar o potencial de membrana em repouso e a entrada de Ca2+ dependente da excitabilidade, o KV1.1 conecta-se a vias que regulam a liberação de neurotransmissores e a expressão gênica dependente da atividade. Alterações genéticas e funcionais de KCNA1 estão associadas a fenótipos neurológicos, incluindo ataxia episódica e suscetibilidade a crises convulsivas, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos da biologia das canalopatias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KV1.1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KV1.1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNA1 para a investigação da sinalização de KV1.1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNA1 críticos para a função KV1.1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNA1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KV1.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KV1.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KV1.1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KV1.1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.