KOR-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401354-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KOR-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase KOR-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase KOR-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para OPRK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KOR-1 Anticorpo (D-8): sc-374479
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KOR-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401354-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KOR-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401354-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OPRK1 codifica o receptor opioide kappa humano (KOR-1), um GPCR acoplado a Gi/Go que modula a excitabilidade neuronal e a libertação de neurotransmissores em resposta às dinorfinas endógenas. A sinalização do KOR-1 inibe a adenilil ciclase, reduz a atividade de cAMP/PKA e ativa cascatas de MAPK, incluindo ERK1/2 e p38, com efeitos a jusante sobre a função de canais iónicos e a plasticidade sináptica. O recetor participa na recompensa, na responsividade ao stress, no processamento da dor e na regulação neuroendócrina, e alterações na sinalização de OPRK1 têm sido estudadas em fenótipos neuropsiquiátricos e nociceptivos. In vitro, OPRK1 constitui um alvo acessível para ligar a dinâmica da sinalização de GPCR a programas transcricionais e à adaptação celular em modelos neuronais relevantes e em modelos celulares engenheirados.
KOR-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus OPRK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de OPRK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função OPRK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com OPRK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.