KLK12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407376

概要

KLK12は、分泌型セリンプロテアーゼであるカリクレイン関連ペプチダーゼ12をコードしており、細胞外マトリックス（ECM）のリモデリングや細胞周囲のプロテオリシスに寄与します。ペプチド基質をプロセシングし、プロテアーゼカスケード活性に影響を与えることで、KLK12は細胞—マトリックス相互作用、組織恒常性、ならびに遊走や血管新生応答に関連するシグナル伝達イベントを調節し得ます。KLK12発現の変化は、がんを含む複数のヒト病態で報告されており、プロテオリシスのバランスの変動が、浸潤に関与する微小環境プロセスに影響し得ます。文脈依存的な活性をもつ可溶性プロテアーゼとして、KLK12は腫瘍生物学、血管調節、炎症に関連した組織リモデリングのモデルでしばしば研究されています。

KLK12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKLK12遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KLK12内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KLK12のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KLK12タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KLK12シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KLK12欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KLK12の機能に不可欠なKLK12エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KLK12ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KLK12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKLK12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KLK12遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KLK12 HDRプラスミド（h）および KLK12 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKLK12ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKLK12標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。