KIR6.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401477

Visão geral

KCNJ8 codifica a subunidade do canal de potássio retificador de entrada KIR6.1 (Kir6.1), um componente central dos canais de potássio sensíveis ao ATP (KATP) que conectam o estado metabólico celular à excitabilidade da membrana. Em muitos tecidos, Kir6.1 atua em parceria com subunidades do receptor de sulfonilureia para regular o fluxo de potássio em resposta a alterações na razão ATP/ADP, influenciando o tônus do músculo liso vascular, as respostas celulares ao estresse e a sinalização dependente de excitabilidade. Ao ligar a detecção de nucleotídeos à condutância iônica, KIR6.1 contribui para processos como estabilização do potencial de membrana, regulação do cálcio e homeostase bioenergética. Alterações genéticas e funcionais em KCNJ8 têm sido associadas a canalopatias e fenótipos cardiovasculares, reforçando sua relevância para estudos mecanísticos em células excitáveis e em contextos de sinalização metabólica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KIR6.1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNJ8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNJ8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNJ8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KIR6.1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNJ8 para a investigação da sinalização de KIR6.1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNJ8 críticos para a função KIR6.1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNJ8 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KIR6.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KIR6.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNJ8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KIR6.1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KIR6.1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNJ8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNJ8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.