KIR4.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402244
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KIR4.1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KIR4.1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KIR4.1 Anticorpo (1C11): sc-293252
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KIR4.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402244 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O KCNJ10 humano codifica o canal de potássio retificador de entrada KIR4.1, uma proteína de membrana que ajuda a estabelecer o potencial de membrana em repouso e regula o tamponamento de potássio e a redistribuição espacial de K+ em contextos gliais e epiteliais. O KIR4.1 sustenta a homeostase de íons e de água por meio de acoplamento funcional a processos de transporte e contribui para a manutenção do K+ extracelular e do equilíbrio osmótico, influenciando a excitabilidade neuronal e a estabilidade do microambiente tecidual. A atividade desregulada de KCNJ10/KIR4.1 tem sido associada a alterações na fisiologia glial, ruptura da homeostase iônica e fenótipos neurológicos, tornando-o um alvo relevante para o estudo de vias de sinalização e de homeostase dependentes de canais iônicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KIR4.1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNJ10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNJ10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNJ10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KIR4.1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNJ10 para a investigação da sinalização de KIR4.1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNJ10 críticos para a função KIR4.1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNJ10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KIR4.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KIR4.1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNJ10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KIR4.1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KIR4.1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNJ10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNJ10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.