KIR2.3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406604

Visão geral

KCNJ4 codifica o canal de potássio retificador de entrada KIR2.3, uma proteína de membrana tetramérica que conduz preferencialmente K+ em potenciais hiperpolarizados para estabilizar o potencial de membrana em repouso e modular a excitabilidade celular. A atividade do KIR2.3 contribui para a homeostase do potássio e para a sinalização elétrica, influenciando processos como a repolarização do potencial de ação e o acoplamento da excitabilidade em tecidos excitáveis. Como parte da família Kir2.x, ele se conecta funcionalmente a vias que dependem da polarização da membrana, incluindo sinalização dependente de Ca2+ e acoplamento estímulo-secreção. A função alterada de canais retificadores de entrada é relevante para estudos de eletrofisiologia, mecanismos arritmogênicos e disfunções de células excitáveis, tornando o KCNJ4 um alvo útil para dissecar a contribuição de canais iônicos para fenótipos celulares.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KIR2.3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNJ4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNJ4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNJ4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KIR2.3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNJ4 para a investigação da sinalização de KIR2.3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNJ4 críticos para a função KIR2.3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNJ4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KIR2.3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KIR2.3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNJ4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KIR2.3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KIR2.3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNJ4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNJ4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.