KIF13A Double Nickaseプラスミド (h): sc-403751-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- KIF13A Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- KIF13Aダブルニカースプラスミド（h）およびKIF13Aダブルニカースプラスミド（h2）は、KIF13Aを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
KIF13A Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KIF13A Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIF13Aは、キネシン3ファミリーに属する微小管モーターをコードしており、膜性コンパートメントを微小管のプラス端方向へ輸送することで、小胞輸送、エンドソーム動態、ならびに遊走・分化する細胞における極性を伴ったカーゴ配送を制御します。微小管をRab関連小胞や極性制御因子と連結させることを通じて、KIF13Aは受容体のリサイクリング、膜リモデリング、細胞骨格の協調といった過程に寄与します。KIF13Aに依存する輸送が攪乱されると、シグナル出力や細胞小器官の配置が変化し、免疫機能、神経輸送、バリア機能などの細胞プログラムに関わる可能性があります。遺伝学的・機能的研究により、KIF13Aは細胞内輸送や上皮／免疫の制御異常に関連する疾患関連経路と結び付けられており、ヒト細胞モデルで機構を精査する動機となっています。
KIF13A ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における KIF13A 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、KIF13A内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、KIF13Aの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、KIF13Aが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。