KIAA1432 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417074
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KIAA1432 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KIAA1432, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KIAA1432 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417074 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RIC1 (KIAA1432) codifica um componente conservado do complexo fator de troca de nucleotídeos de guanina RIC1–RGP1, que regula o tráfego de membranas dependente de Rab6. Esse complexo sustenta a ancoragem e o transporte retrógrado de endossomos para a rede trans-Golgi e contribui para a organização do Golgi, o acoplamento de vesículas e a secreção polarizada. Por meio de seu papel na manutenção da integridade do Golgi e da fidelidade do transporte intracelular, KIAA1432 é relevante para fenótipos celulares ligados à migração, adesão e proteostase. O tráfego vesicular desregulado e vias associadas ao Golgi são frequentemente implicados na biologia de doenças proliferativas e do neurodesenvolvimento, tornando RIC1 um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização dependente de tráfego.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KIAA1432 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RIC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RIC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RIC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KIAA1432.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RIC1 para a investigação da sinalização de KIAA1432, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RIC1 críticos para a função KIAA1432
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RIC1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KIAA1432 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KIAA1432 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RIC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KIAA1432 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KIAA1432 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RIC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RIC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.