KCTD3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-412124
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- KCTD3 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在KCTD3基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
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KCTD3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-412124 | 20 µg | $397.00 |
概述
KCTD3（potassium channel tetramerization domain containing 3，含钾通道四聚化结构域蛋白3）编码一种含 BTB/POZ 结构域的蛋白，参与蛋白–蛋白相互作用，可影响多蛋白复合体的组装并调控蛋白质稳态。KCTD 家族成员常与 cullin-3（CUL3）相关的泛素连接酶生物学过程有关，并通过靶向降解来调控信号通路中间体，提示其在通路精细调节与细胞稳态维持中发挥作用。通过这些相互作用网络，KCTD3 与细胞生长控制、应激反应以及分化相关程序等研究密切相关，尤其是在依赖泛素化进行重塑的过程中更为突出。BTB/KCTD 为中心的复合体发生失调与癌症和神经生物学等疾病相关表型有关，因此有必要在信号异常与蛋白质质量控制改变的机制模型中进一步研究 KCTD3。
KCTD3 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中KCTD3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对KCTD3基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏KCTD3开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使KCTD3蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建KCTD3缺失的细胞模型，用于KCTD3信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 KCTD3 功能至关重要的 KCTD3 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 KCTD3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 KCTD3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 KCTD3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 KCTD3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 KCTD3 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 KCTD3 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由KCTD3同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定KCTD3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。