Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
karyopherin β3 Antibody (A-2): sc-514122. Western blot analysis of karyopherin β3 expression in HeLa (A), Jurkat (B), HEL 92.1.7 (C), NTERA-2 cl.D1 (D) and A2058 (E) whole cell lysates and HeLa nuclear extract (F).
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karyopherin β3双切口酶质粒(h): sc-402071-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- karyopherin β3 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- karyopherin β3双切酶质粒（h）和karyopherin β3双切酶质粒（h2）编码针对IPO5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：karyopherin β3: sc-55527，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
karyopherin β3双切口酶质粒(h) | sc-402071-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
karyopherin β3双切口酶质粒(h2) | sc-402071-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IPO5 编码核转运蛋白 karyopherin β3（importin-5），是一种核转运受体，能够识别特定的核定位信号，并通过核孔复合体介导 Ran GTP 酶依赖的蛋白质货物入核运输。通过调控核—胞质之间的转运，IPO5 通过对转录因子和 RNA 结合蛋白的空间定位进行调节，进而参与调控转录程序、细胞周期进程以及与分化相关的信号通路。转运蛋白活性改变与核转运失衡是癌症及其他增殖性疾病中的常见特征；已有研究将 IPO5 与调控蛋白错误定位所致的异常生长信号联系起来。因此，IPO5 常在核转运通路重塑、应激反应以及转化细胞的全基因组依赖性研究中被重点关注。
karyopherin β3 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 IPO5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IPO5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏IPO5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了IPO5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。