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karyopherin β1双切口酶质粒(h) | sc-401230-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
karyopherin β1双切口酶质粒(h2) | sc-401230-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KPNB1 编码核转运蛋白 β1(karyopherin β1,亦称 importin-β1),是一种核心的核转运受体,在 RanGTP 依赖的机制下,与 importin-α 适配蛋白协同,将携带经典核定位信号(NLS)的蛋白导入细胞核。通过调控转录因子、DNA 修复蛋白以及细胞周期调控因子的核质运输,KPNB1 影响基因表达程序、检查点控制和应激响应信号传导。由于选择性核导入会协调复制、转录以及核糖核蛋白复合体装配,该通路对有丝分裂进程和蛋白质稳态(proteostasis)至关重要。核转运动力学的改变及 KPNB1 活性失调与增殖增强和应激适应等表型相关,因此它是研究致癌信号、基因组维护以及宿主–病原体相互作用的有用靶点。
karyopherin β1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 KPNB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KPNB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏KPNB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了KPNB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。