KA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403522-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KA1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase KA1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase KA1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRIK4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403522-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403522-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIK4 codifica a subunidade KA1 do receptor ionotrópico de glutamato do tipo cainato, um componente da neurotransmissão excitatória que modula a sinalização sináptica e a excitabilidade das redes neuronais. A KA1 contribui para a montagem do receptor e para as propriedades de abertura/fechamento do canal nas sinapses glutamatérgicas, sustentando a plasticidade dependente da atividade e o processamento de informação ao nível dos circuitos. Ao acoplar a atividade dos recetores de glutamato a cascatas de sinalização permeáveis ao cálcio, a GRIK4 influencia vias a jusante envolvidas na remodelação sináptica e na sobrevivência neuronal. Estudos genéticos e de expressão associaram a desregulação de GRIK4/KA1 a fenótipos neuropsiquiátricos e do neurodesenvolvimento, reforçando a sua relevância para investigação mecanística em modelos de doenças do SNC.
KA1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRIK4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRIK4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRIK4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRIK4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.