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JMJD2CCRISPR激活质粒(h) | sc-403282-ACT | 20 µg | $397.00 |
KDM4C(JMJD2C)编码一种含 Jumonji C(JmjC)结构域的组蛋白去甲基化酶,主要去除抑制性甲基化标记(如 H3K9me3/me2),从而促进染色质开放并增强转录活性。通过对组蛋白甲基化的动态调控,JMJD2C 影响与细胞周期进程、DNA 损伤应答以及谱系特异性转录网络相关的基因表达程序的表观遗传控制。KDM4C 活性失调与多种癌症中观察到的异常染色质状态有关,其中增强子和启动子可及性的改变可进一步强化致癌性转录回路。作为一种核内染色质调控因子,JMJD2C 常被用于研究其在转录因子协同作用、染色质重塑以及维持人类细胞表观遗传可塑性方面的功能。
JMJD2C CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性KDM4C的表达。
JMJD2C CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的KDM4C基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于KDM4C转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性JMJD2C表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的KDM4C位点,并能够研究内源性位点上依赖于JMJD2C的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在KDM4C表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟JMJD2C通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。