Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Jagged2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401322-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Jagged2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Jagged2 Double Nickase Plasmid (h) e il Jagged2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira JAG2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Jagged2 Antibody (F-4): sc-515725
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Jagged2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401322-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Jagged2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401322-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JAG2 codifica Jagged2, un ligando di membrana che si lega ai recettori NOTCH per regolare la segnalazione juxtacrina che controlla le decisioni sul destino cellulare, la proliferazione e la differenziazione. L’attivazione di NOTCH mediata da Jagged2 influenza i programmi trascrizionali tramite geni bersaglio dipendenti da RBPJ/CSL e si integra con vie coinvolte nello sviluppo e nell’omeostasi tissutale. Una deregolazione della segnalazione JAG2/NOTCH è stata implicata in una specificazione di linea anomala, in un comportamento alterato di cellule staminali o progenitrici e in cambiamenti dipendenti dal contesto nelle dinamiche epitelio–mesenchimali. Di conseguenza, JAG2 è spesso studiato in modelli di sviluppo, immunobiologia e in patologie caratterizzate da un’alterazione dell’attività della via NOTCH.
Jagged2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus JAG2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di JAG2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di JAG2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con JAG2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.