Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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JAB1双切口酶质粒(m): sc-424107-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- JAB1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- JAB1双切酶质粒（m）和JAB1双切酶质粒（m2）编码针对Cops5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：JAB1: sc-13157，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
JAB1双切口酶质粒(m) | sc-424107-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JAB1双切口酶质粒(m2) | sc-424107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Cops5 编码 JAB1（CSN5），它是 COP9 信号体（COP9 signalosome）的金属蛋白酶亚基，负责催化 cullin 去 NEDD8 化，从而调控 cullin-RING 型 E3 泛素连接酶的活性与蛋白质稳态。通过这一作用，JAB1 通过控制关键调控蛋白（包括 AP-1 转录程序的调节因子）的周转与定位，协调细胞周期进程、DNA 损伤应答以及信号转导输出。JAB1 还与调控凋亡、应激反应和炎症信号的通路发生互作，将依赖泛素的调控与情境特异性的转录控制相连接。CSN5/COP9 功能失调与多种疾病相关模型中的异常增殖及信号状态改变有关，因此 Cops5 常被用作研究泛素–蛋白酶体通路调控机制的靶点。
JAB1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Cops5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cops5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Cops5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Cops5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。