Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IRAK-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421100
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IRAK-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IRAK-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IRAK-1 Anticorpo (F-4): sc-5288
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IRAK-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421100 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Irak1 codifica a quinase 1 associada ao receptor de interleucina-1 (IRAK-1), uma quinase de serina/treonina que atua como um transdutor central de sinais a jusante da ativação do receptor de IL-1 e de receptores do tipo Toll em células da imunidade inata de camundongos. Após a estimulação do receptor, a IRAK-1 participa da sinalização dependente de MyD88, coordenando a montagem do complexo IRAK–TRAF6 para promover a ativação das vias de NF-κB e MAPK e a subsequente expressão de genes inflamatórios. A IRAK-1 também contribui para a regulação da produção de citocinas, respostas de interferon e a comunicação cruzada com sinalização dependente de ubiquitina e processos relacionados ao inflamassoma. A sinalização desregulada de IRAK-1 é relevante em modelos experimentais de inflamação crônica e autoimunidade, suscetibilidade a infecções e fenótipos do microambiente tumoral associados à inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IRAK-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Irak1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Irak1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Irak1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IRAK-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Irak1 para a investigação da sinalização de IRAK-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Irak1 críticos para a função IRAK-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Irak1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IRAK-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IRAK-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Irak1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IRAK-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IRAK-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Irak1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Irak1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.