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Integrin αL/ITGAL/CD11a双切口酶质粒(h) | sc-402246-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin αL/ITGAL/CD11a双切口酶质粒(h2) | sc-402246-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGAL 编码整合素 αL(CD11a)。该蛋白与整合素 β2(CD18)形成异源二聚体,构成 LFA-1——一种对白细胞黏附至关重要的受体,参与免疫细胞的迁移运输及细胞–细胞相互作用。LFA-1 与 ICAM 家族配体结合可调控牢固黏附、跨内皮迁移以及免疫突触的形成,将细胞外信号与细胞骨架重塑相耦联,并激活整合素“外向内”(outside-in)信号、SRC 家族激酶激活以及与黏着斑相关的过程等通路。ITGAL 的活性会影响淋巴细胞激活阈值、抗原依赖的效应功能以及炎症反应的协调。LFA-1–ICAM 相互作用失衡及 ITGAL 表达改变与免疫介导的病理过程和白细胞黏附缺陷有关,因此该基因常用于炎症、自身免疫以及肿瘤–免疫微环境动态研究。
Integrin αL/ITGAL/CD11a 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ITGAL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ITGAL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ITGAL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ITGAL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。