Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421162

Übersicht

Itga4 kodiert Integrin α4 (ITGA4/CD49d), eine α‑Untereinheit, die mit β1 oder β7 dimerisiert und so die Integrine α4β1 (VLA‑4) und α4β7 bildet – zentrale Vermittler der Zell‑Zell‑ und Zell‑Matrix‑Adhäsion. Diese Rezeptoren binden Liganden wie VCAM1 und Fibronectin und koordinieren damit den Leukozytenverkehr, feste Adhäsion und die transendotheliale Migration im Rahmen der Immunüberwachung und Entzündung. Die ITGA4‑Signalgebung ist in fokale Adhäsions‑ und Zytoskelett‑Remodeling‑Signalwege eingebunden und beeinflusst Migrations‑, Überlebens‑ und Aktivierungsprogramme; zudem trägt sie zur Positionierung hämatopoetischer und lymphoider Zellen in Geweben bei. Eine fehlregulierte α4‑Integrin‑Aktivität ist umfassend untersucht – sowohl in der Pathobiologie entzündlicher und autoimmuner Erkrankungen als auch bei Tumor‑Stroma‑Interaktionen, die Invasion und metastatische Ausbreitung unterstützen.

Das Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Itga4-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Itga4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Itga4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Integrin α4/ITGA4/CD49d-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Itga4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Integrin α4/ITGA4/CD49d-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Itga4-Exone abzielen, die für die Integrin α4/ITGA4/CD49d-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Itga4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Itga4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Integrin α4/ITGA4/CD49d HDR-Plasmid (m) und Integrin α4/ITGA4/CD49d HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Itga4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Itga4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.