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Integrin β3/ITGB3/CD61双切口酶质粒(m) | sc-421175-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin β3/ITGB3/CD61双切口酶质粒(m2) | sc-421175-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Itgb3 编码整合素 β3(ITGB3/CD61),这是一种跨膜黏附受体,可与 αIIb 或 αV 配对形成异源二聚体整合素,在血小板聚集、细胞–基质黏附以及由外向内/由内向外信号传导中起核心作用。ITGB3 通过包括 FAK/Src、PI3K–AKT 和 Rho 家族 GTP 酶在内的通路调控黏着斑动力学与细胞骨架重塑,从而协调迁移、生存与机械力信号转导。在免疫与基质(间质)环境中,ITGB3 介导的与细胞外基质配体的相互作用会影响炎症细胞迁徙与组织重塑;而在实验模型中,整合素信号的异常与止血功能障碍以及异常的血管表型和肿瘤相关微环境表型有关。这些特性使 Itgb3 成为研究整合素依赖的信号网络、依赖黏附的基因调控以及对生物力学线索的情境特异性反应的有价值靶点。
Integrin β3/ITGB3/CD61 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Itgb3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Itgb3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Itgb3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Itgb3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。