Integrin β3/ITGB3/CD61CRISPR激活质粒(h): sc-400216-ACT

ITGB3 编码整合素 β3（CD61），这是一种跨膜黏附受体，可与 αIIb 形成异二聚体（构成 αIIbβ3），或与 αV 形成异二聚体（构成 αVβ3），从而介导与细胞外基质配体（如纤维蛋白原、玻连蛋白和纤维连接蛋白）的结合。通过黏着斑的组装以及由外向内/由内向外（outside-in/inside-out）信号传导，整合素 β3 通过包括 FAK/SRC、PI3K–AKT 和 MAPK 在内的通路，协调细胞黏附、血小板聚集、细胞骨架重塑和迁移。ITGB3 的活性是血小板功能与血栓形成的关键因素，同时也参与内皮细胞和肿瘤细胞与微环境的相互作用。整合素 β3 信号传导失调与止血异常、炎症，以及在多种疾病背景下支持血管生成和转移的过程相关。

Integrin β3/ITGB3/CD61 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGB3的表达。

Integrin β3/ITGB3/CD61 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ITGB3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ITGB3转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Integrin β3/ITGB3/CD61表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ITGB3位点，并能够研究内源性位点上依赖于Integrin β3/ITGB3/CD61的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGB3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin β3/ITGB3/CD61通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。