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Integrin α3/ITGA3/CD49c双切口酶质粒(h) | sc-400841-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α3/ITGA3/CD49c双切口酶质粒(h2) | sc-400841-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGA3 编码整合素 α3(CD49c)。整合素 α3 主要与整合素 β1 形成异源二聚体,构成一种可结合层粘连蛋白(laminin)的受体,将细胞外基质与肌动蛋白细胞骨架连接起来。该黏附复合体调控黏着斑(focal adhesion)动态、细胞极性以及“外向内”(outside-in)信号传导,可通过 FAK/Src、PI3K–AKT 和 MAPK 等通路发挥作用,从而影响细胞迁移、生存以及上皮—间充质相互作用。整合素 α3 对基底膜的组织与上皮组织完整性至关重要;ITGA3 活性异常与细胞侵袭性行为、纤维化相关重塑以及失调的创伤修复程序有关。在生物医学研究中,ITGA3 常被用于解析细胞—基质通讯、机械转导,以及在上皮与肿瘤微环境模型中层粘连蛋白依赖的运输与形态发生过程。
Integrin α3/ITGA3/CD49c 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ITGA3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ITGA3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ITGA3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ITGA3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。