Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-421161-KO-2

概要

Itga3はインテグリンα3（ITGA3/CD49c）をコードしており、これはβ1サブユニットとヘテロ二量体を形成してラミニン結合性インテグリンα3β1となる、細胞―細胞外マトリックス接着の主要なメディエーターです。焦点接着シグナル伝達を介して、ITGA3は細胞骨格の構築に影響を与え、FAK/Src、PI3K–AKT、MAPKなどの下流経路を活性化して、細胞移動、生存、上皮形態形成を制御します。マウス組織では、インテグリンα3は基底膜との相互作用や上皮バリア構造の形成に寄与し、創傷に伴うリモデリングや細胞極性などの過程との関連が示されています。ITGA3インテグリンのシグナル伝達異常は、浸潤性挙動、炎症に伴う組織リモデリング、臓器発生における表現型といった文脈でしばしば研究されています。

Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるItga3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Itga3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Itga3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Integrin α3/ITGA3/CD49cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Integrin α3/ITGA3/CD49cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Itga3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Integrin α3/ITGA3/CD49cの機能に不可欠なItga3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Itga3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIntegrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Itga3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Integrin α3/ITGA3/CD49c HDRプラスミド（m）および Integrin α3/ITGA3/CD49c HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはItga3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のItga3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。