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Integrin α11/ITGA11CRISPR激活质粒(h) | sc-402541-ACT | 20 µg | $397.00 |
ITGA11 编码整合素 α11(integrin α11),这是一种 α 亚基,可与 β1 配对形成胶原结合受体,在细胞—细胞外基质黏附与机械传导中发挥重要作用。整合素 α11/β1 支持胶原重塑、成纤维细胞迁移以及基质微环境的组织构建,将基质结合与细胞骨架动力学及多条信号通路连接起来,例如黏着斑/FAK、SRC 家族激酶,以及下游的 MAPK 和 PI3K-AKT 级联反应。通过这些过程,ITGA11 参与组织重塑与纤维化反应;其失调也常在基质信号改变和细胞侵袭行为等研究背景中被关注。因此,调控 ITGA11 的表达有助于探究富胶原微环境、依赖黏附的信号传导以及由基质驱动的表型可塑性。
Integrin α11/ITGA11 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGA11的表达。
Integrin α11/ITGA11 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的ITGA11基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于ITGA11转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Integrin α11/ITGA11表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的ITGA11位点,并能够研究内源性位点上依赖于Integrin α11/ITGA11的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGA11表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin α11/ITGA11通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。