Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
IL-23 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429901
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IL-23 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IL-23, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-23 Anticuerpo (C-3): sc-271279
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IL-23 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-429901 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Il23a codifica la subunidad p19 de la interleucina 23 (IL-23), una citocina heterodimérica que se asocia con IL-12p40 para formar IL-23 y señaliza a través del complejo receptor de IL-23 para activar las vías JAK/STAT, en particular STAT3. En células mieloides como las células dendríticas y los macrófagos, la IL-23 integra señales de receptores de reconocimiento de patrones para reforzar programas inflamatorios y promover la inmunidad de tipo 17. La IL-23 favorece la expansión y el mantenimiento de las células Th17 y de otras poblaciones productoras de IL-17, conectando la detección innata con las respuestas efectoras de IL-17A/F e IL-22. La actividad desregulada de Il23a/IL-23 se utiliza ampliamente como eje mecanístico en modelos murinos de patología autoinmunitaria e inflamatoria, incluida la inflamación intestinal, la dermatitis tipo psoriasis y la autoinmunidad del sistema nervioso central (SNC).
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-23 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Il23a en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Il23a junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Il23a tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-23.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Il23a para la investigación de la señalización de IL-23, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Il23a críticos para la función de IL-23
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Il23a para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IL-23 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IL-23 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Il23a. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-23 (m) y el plásmido HDR IL-23 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Il23a para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Il23a definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.