IL-1RAcP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402026-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-1RAcPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IL-1RAcP (h) e o Plasmídeo Double Nickase IL-1RAcP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IL1RAP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-1RAcP Anticorpo (D-5): sc-376872
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-1RAcP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402026-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-1RAcP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402026-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano IL1RAP codifica a proteína acessória do recetor de IL-1 (IL-1RAcP), um co-recetor essencial para a sinalização de citocinas da família da IL-1, incluindo IL-1α/IL-1β via IL-1R1 e IL-33 via ST2. Após a ligação do ligando, a IL-1RAcP apoia a montagem do complexo recetor e a sinalização dependente de MyD88, que ativa cascatas IRAK/TRAF6, levando à ativação das vias NF-κB e MAPK e à indução de programas génicos pró-inflamatórios. Por estas vias, a IL-1RAcP contribui para a regulação da ativação imunitária inata, o recrutamento de leucócitos e circuitos de amplificação de citocinas. A desregulação da sinalização associada ao IL1RAP tem sido implicada em inflamação crónica e patologia imunomediada, e o IL1RAP também é estudado na comunicação tumor–microambiente e na biologia de neoplasias hematológicas.
IL-1RAcP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IL1RAP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IL1RAP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IL1RAP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IL1RAP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.