IL-1ra Double Nickaseプラスミド (m): sc-421102-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IL-1ra Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IL-1raダブルニカースプラスミド（m）およびIL-1raダブルニカースプラスミド（m2）は、Il1rnを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IL-1ra Double Nickaseプラスミド (m) | sc-421102-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-1ra Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-421102-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスの Il1rn は、IL-1受容体アンタゴニスト（IL-1ra）をコードしている。IL-1ra は内因性の競合阻害因子として IL-1α/IL-1β シグナル伝達を抑制し、IL-1R1 の活性化およびその下流の MyD88 依存的な NF-κB／MAPK 経路の活性化を制限する。炎症促進性の転写プログラムやサイトカイン増幅を抑えることで、IL-1ra は自然免疫細胞の活性化、白血球のリクルート、ならびに組織恒常性の調節に寄与する。Il1rn 活性の変化は、関節炎様表現型、炎症性腸疾患に関連する病態、皮膚炎症などを含む炎症制御不全のモデル化に用いられており、サイトカインネットワークのフィードバックや炎症収束機構を解析するための扱いやすい標的軸を提供する。
IL-1ra ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Il1rn 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Il1rn内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Il1rnの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Il1rnが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。