IL-17RB CRISPR Activation Plasmid (h): sc-404114-ACT
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- IL-17RB CRISPR Activation Plasmid (h) ist ein Transkriptionsaktivierungs System (SAM) welches für die gezielte Verstärkung der Genexpression bestimmt ist
- IL-17RB CRISPR Aktivierungsplasmide (h) bestehen aus 3 Plasmiden im Massenverhältnis 1:1:1: ein Plasmid kodiert für die deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungsdomaine VP64 sowie ein Gen für die Blasticidin Resistenz; ein zweites Plasmid kodierend für das MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein sowie ein Gen für die Hygromycin Resistenz; ein drittes Plasmid kodierd für die Ziel-spezifische 20 nt guide RNA fusioniert an zwei MS2 RNA Aptamere sowie ein Gen für die Puromycin Resistenz.
- Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
- Die vom IL-17RB CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) und vom IL-17RB CRISPR-Aktivierungsplasmid (h2) kodierten gRNAs zielen auf unterschiedliche regulatorische Regionen stromaufwärts der IL17RB-Transkriptionsstartstelle ab. Eines oder beide Designs sind möglicherweise verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-17RB CRISPR Activation Plasmid (h) | sc-404114-ACT | 20 µg | $397.00 |
IL17RB kodiert den Interleukin‑17‑Rezeptor B (IL‑17RB), einen Typ‑I‑transmembranären Zytokinrezeptor, der mit IL17RA zusammenwirkt, um Signale von Liganden der IL‑17‑Familie zu übertragen – insbesondere von IL‑25 (IL‑17E). Die Rezeptorbindung rekrutiert Adapterproteine wie ACT1 und aktiviert dadurch NF‑κB‑ und MAPK‑Signalprogramme; so wird die Wahrnehmung durch Epithel‑ und Stromazellen mit der Chemokinproduktion, mukosaler Entzündung und einer Typ‑2‑Immunpolarisierung verknüpft. Die Aktivität von IL‑17RB beeinflusst den Austausch zwischen Atemwegs‑ und Barrieregeweben, myeloiden Zellen und lymphoiden Subpopulationen und prägt Reaktionen auf Allergene und Helminthen ebenso wie breitere entzündliche Umbauprozesse. Eine fehlregulierte IL17RB‑Expression oder Signalübertragung wurde mit chronischen Entzündungszuständen und Veränderungen des tumorassoziierten Immunmikromilieus in Verbindung gebracht, was IL17RB für mechanistische Studien zur Immunsignalgebung und Zell‑Zell‑Kommunikation relevant macht.
IL-17RB Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) bietet einen gezielten, nicht-destruktiven Ansatz zur Hochregulierung der endogenen IL17RB-Expression, ohne die zugrunde liegende DNA-Sequenz zu verändern.
IL-17RB Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) ist ein aus drei Plasmiden bestehendes synergistisches Aktivierungsmediator-System (SAM), das für eine hocheffiziente, ortsspezifische transkriptionelle Hochregulation des IL17RB-Lokus in menschlichen Zelllinien entwickelt wurde. Das System basiert auf einem katalytisch inaktiven Cas9 (dCas9), das zwei inaktivierende Mutationen (D10A und N863A) trägt, welche die Nukleaseaktivität eliminieren, während die DNA-Bindung erhalten bleibt. Dieses dCas9 ist mit VP64, einem potenten Transkriptionsaktivator, fusioniert und wird zusammen mit einem Blasticidin-Resistenzgen zur Selektion koexprimiert. Das zweite Plasmid kodiert das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein, einen sekundären Aktivatorkomplex, der zusammen mit dCas9-VP64 wirkt, sowie ein Hygromycin-Resistenzgen. Das dritte Plasmid kodiert für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA, die an zwei MS2-RNA-Aptamere fusioniert ist, welche den MS2-p65-HSF1-Komplex an die Aktivierungsstelle rekrutieren, begleitet von einem Puromycin-Resistenzgen. Die drei Plasmide werden im Massenverhältnis 1:1:1 verabreicht, um eine ausgewogene Expression aller Systemkomponenten zu gewährleisten.
Nach der Assemblierung am Zielort bindet der SAM-Komplex etwa 200 bp stromaufwärts der IL17RB-Transkriptionsstartstelle, wo VP64, p65 und HSF1 gemeinsam die Transkriptionsmaschinerie rekrutieren und die Hochregulation der endogenen IL-17RB-Expression vorantreiben. Im Gegensatz zu nukleaseaktivem Cas9 verursacht dCas9 keine Doppelstrangbrüche und verändert die genomische Sequenz nicht, wodurch der native IL17RB-Locus erhalten bleibt und die Untersuchung von IL-17RB-abhängigen Transkriptionsreaktionen am endogenen Locus ermöglicht wird. Dies macht es zu einem wertvollen Werkzeug für Funktionsstudien, die Identifizierung von Zielgenen und die Modellierung der Wiederherstellung des IL-17RB-Signalwegs in Tumorzellen mit stillgelegtem oder reduziertem IL17RB-Ausdruck.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.