IL-11Rα Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402503
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-11Rα Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico IL-11Rα, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-11Rα Antibody (4D12): sc-130920
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-11Rα Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-402503 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
IL11RA umano codifica la subunità alfa del recettore dell’interleuchina-11 (IL-11Rα), una subunità di legame del ligando che si associa al trasduttore di segnale comune GP130 per avviare la segnalazione dipendente da IL-11. Il legame al recettore attiva a valle le vie JAK/STAT, MAPK/ERK e PI3K/AKT, influenzando programmi trascrizionali che regolano la differenziazione cellulare, la sopravvivenza e il rimodellamento tissutale. L’attività di IL11RA è implicata nella comunicazione stroma–epitelio e nella regolazione delle risposte infiammatorie e fibrotiche in molteplici contesti tissutali. Una segnalazione disregolata di IL-11Rα è stata associata a fenotipi di rimodellamento patologico e a reti di segnalazione oncogeniche, rendendola rilevante per studi meccanicistici sulla biologia delle malattie legate a fibrosi e infiammazione.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-11Rα (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene IL11RA in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del IL11RA insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto IL11RA a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-11Rα.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di IL11RA per lo studio della segnalazione di IL-11Rα, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni IL11RA critici per la funzione di IL-11Rα
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di IL11RA per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal IL-11Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal IL-11Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus IL11RA. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal IL-11Rα Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR IL-11Rα (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia IL11RA per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio IL11RA definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.