IKKγ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400274-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IKKγO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IKKγ (h) e o Plasmídeo Double Nickase IKKγ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IKBKG. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IKKγ Anticorpo (F-10): sc-166398
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IKKγ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400274-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IKKγ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400274-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IKBKG codifica a IKKγ (NEMO), a subunidade regulatória do complexo IKK que conecta a sinalização de receptores a montante à fosforilação e degradação das proteínas IκB, permitindo respostas transcricionais mediadas por NF-κB. Por meio de sinais provenientes de TNFR, IL-1R/TLRs, receptores de antígeno e vias citosólicas de estresse, a IKKγ ajuda a coordenar a expressão de genes inflamatórios, a sinalização imune inata e adaptativa, programas de sobrevivência celular e respostas a dano ao DNA. A disfunção de IKBKG compromete a ativação da via canônica de NF-κB e pode alterar redes de citocinas, a sensibilidade à apoptose e a homeostase de barreira/ectodérmica. Variantes em IKBKG estão associadas a fenótipos de imunodeficiência e displasia ectodérmica, e a regulação aberrante de NF-κB é amplamente relevante para mecanismos de doenças inflamatórias e estudos de sinalização oncogênica.
IKKγ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IKBKG em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IKBKG. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IKBKG. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IKBKG interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.