Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IKK alpha Double Nickase Plasmid (h): sc-400492-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IKK alpha Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IKK alpha Double-Nickase-Plasmid (h) und IKK alpha Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CHUK abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IKK alpha: sc-7606
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IKK alpha Double Nickase Plasmid (h) | sc-400492-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IKK alpha Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400492-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHUK kodiert IKK alpha (IKKα), eine katalytische Untereinheit des IκB‑Kinase-Komplexes, der die NF‑κB‑Signalübertragung durch eine phosphorylierungsabhängige Kontrolle der IκB‑Stabilität und nachgelagerter Transkriptionsprogramme reguliert. Über die kanonische NF‑κB‑Aktivierung hinaus spielt IKKα eine zentrale Rolle in der nichtkanonischen NF‑κB‑Signalgebung, indem es die Prozessierung von NF‑κB2 p100 zu p52 vermittelt und damit die Organogenese lymphoider Organe, die B‑Zell-Reifung sowie die Expression inflammatorischer Gene beeinflusst. IKKα ist zudem in Signalwege eingebunden, die Zellüberleben, Differenzierung und Stressantworten steuern, wodurch die CHUK‑Aktivität kontextabhängig mit der Regulation von Proliferation und Apoptose verknüpft ist. Eine dysregulierte Aktivität der IKKα/NF‑κB‑Achse wird häufig im Zusammenhang mit der tumorbiologischen Forschung zu inflammationsassoziierten Krebserkrankungen, Immunfehlregulation und Mechanismen chronisch entzündlicher Erkrankungen untersucht.
IKK alpha Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CHUK-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CHUK abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CHUK-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CHUK-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.