IGFBP7 Plasmide Double Nickase (h): sc-418272-NIC

IGFBP7 (insulin-like growth factor binding protein 7) è una glicoproteina secreta che modula la segnalazione di IGF/insulina regolando la disponibilità dei ligandi e l’interazione con i recettori, influenzando la crescita cellulare, l’adesione e i programmi associati alla senescenza. Contribuisce alle interazioni con la matrice extracellulare e alla segnalazione in risposta allo stress, intersecandosi con vie che plasmano la biologia endoteliale, il rimodellamento tissutale e i microambienti infiammatori. Un’espressione alterata di IGFBP7 è stata riportata in contesti di fibrosi, disfunzione vascolare e rimodellamento dello stroma associato al cancro, dove può influenzare la proliferazione e la dinamica cellula–matrice. Di conseguenza, IGFBP7 è spesso studiata come un nodo di collegamento tra la segnalazione dei fattori di crescita, la regolazione extracellulare e le transizioni dello stato cellulare.

IGFBP7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IGFBP7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IGFBP7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IGFBP7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IGFBP7 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.