IGFBP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421063

Visão geral

Igfbp2 codifica a proteína ligadora do fator de crescimento semelhante à insulina 2 (IGFBP2), um modulador secretado da biodisponibilidade de IGF-I/IGF-II que ajusta a sinalização dos receptores de IGF e as vias downstream PI3K–AKT e MAPK. Ao regular o sequestro e a apresentação de fatores de crescimento, a IGFBP2 influencia a proliferação, a sobrevivência e a migração celulares, bem como as interações com a matriz extracelular durante o desenvolvimento e a remodelação tecidual. Em modelos murinos, alterações na expressão de Igfbp2 têm sido associadas à regulação metabólica, à biologia do tecido adiposo e a respostas neuroinflamatórias ou associadas a lesão, tornando-o um nó útil para estudos em nível de vias. Seus papéis dependentes do contexto na sinalização oncogênica e na remodelação do microambiente também sustentam investigações mecanísticas em modelos relevantes para câncer, sem implicar desfechos clínicos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IGFBP2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Igfbp2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Igfbp2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Igfbp2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IGFBP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Igfbp2 para a investigação da sinalização de IGFBP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Igfbp2 críticos para a função IGFBP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Igfbp2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo IGFBP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IGFBP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Igfbp2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo IGFBP2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IGFBP2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Igfbp2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Igfbp2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.