IGF2R/M6PR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401697-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IGF2R/M6PRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IGF2R/M6PR (h) e o Plasmídeo Double Nickase IGF2R/M6PR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IGF2R. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IGF2R/M6PR Anticorpo (2G11): sc-53146
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IGF2R/M6PR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401697-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGF2R/M6PR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401697-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGF2R (também conhecido como IGF2R/M6PR) codifica o receptor de manose-6-fosfato independente de cátion, uma proteína de tráfego multifuncional que se liga a hidrolases lisossômicas marcadas com M6P e medeia seu direcionamento da rede trans-Golgi e de endossomos para os lisossomos. Ele também atua como um receptor “scavenger” para o IGF2 extracelular, modulando a disponibilidade do fator de crescimento e influenciando programas de sinalização ligados à proliferação e à diferenciação celular. Por meio de seu papel central no transporte endossomo–lisossomo, o IGF2R impacta a função do eixo autofagia–lisossomo, a renovação (turnover) de receptores e a proteostase. A desregulação do IGF2R tem sido associada a alterações na homeostase lisossômica e a desequilíbrios na sinalização de fatores de crescimento relevantes para fenótipos do desenvolvimento e para pesquisas em biologia do câncer.
IGF2R/M6PR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IGF2R em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IGF2R. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IGF2R. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IGF2R interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.