IFN-ω Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409162
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-omega O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IFN-omega, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IFN-ω Anticorpo (1PL11): sc-71318
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-ω Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409162 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IFNW1 codifica o interferon-ômega (IFN-ω), uma citocina de interferon do tipo I que contribui para a defesa antiviral inata e para a regulação imunitária. Após a ativação do complexo do recetor IFNAR, o IFN-ω desencadeia uma sinalização dependente de JAK1/TYK2 para induzir a transcrição, mediada por STAT1/STAT2/IRF9, de genes estimulados por interferão (ISGs), moldando a restrição antiviral, a apresentação de antigénios e o tónus inflamatório. Esta via interseta-se com os programas de IRF e NF-κB para coordenar as respostas de deteção de patógenos e a comunicação com a imunidade adaptativa. A desregulação da sinalização de interferão do tipo I está implicada na suscetibilidade a vírus, na inflamação crónica e em fenótipos autoimunes associados a interferão, tornando o IFNW1 um nó útil para dissecar a biologia do interferão.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IFN-omega (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IFNW1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IFNW1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IFNW1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IFN-omega.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IFNW1 para a investigação da sinalização de IFN-omega, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IFNW1 críticos para a função IFN-omega
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IFNW1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IFN-omega Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IFN-omega Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IFNW1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IFN-omega Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IFN-omega (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IFNW1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IFNW1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.