IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402794

概要

IFNGR2は、インターフェロンγ受容体β鎖（IFN-γRβ）をコードしており、細胞表面でIFNGR1と対になって機能的なIFN-γ受容体複合体を形成するために必須の共受容体です。IFN-γが結合すると、IFN-γRβはJAK1/JAK2の活性化と下流のSTAT1シグナル伝達を支え、抗原のプロセシングと提示、マクロファージ活性化、抗菌免疫に関わる転写プログラムを駆動します。この経路は、より広範な自然免疫・獲得免疫ネットワークとも連動し、炎症応答や免疫監視の在り方を形作ります。IFNGR2の遺伝学的または機能的な破綻はIFN-γ応答性の低下と重症感染症への感受性に関連し、またシグナル伝達ダイナミクスの変化は免疫調節異常や腫瘍—免疫相互作用の研究において重要です。

IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIFNGR2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IFNGR2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IFNGR2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFN-γRβタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFN-γRβシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IFNGR2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFN-γRβの機能に不可欠なIFNGR2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IFNGR2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIFN-γRβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IFNGR2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFN-γRβ HDRプラスミド（h）および IFN-γRβ HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIFNGR2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIFNGR2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。