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IFN-β慢病毒激活颗粒(h) | sc-418564-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 IFNB1 基因编码干扰素β(IFN-β),它是一种 I 型干扰素,可启动先天性抗病毒信号传导,并塑造后续的适应性免疫应答。IFN-β 与 IFNAR 结合后,激活依赖 JAK1/TYK2 的 STAT1/STAT2 磷酸化,并与 IRF9 共同形成 ISGF3,从而诱导干扰素刺激基因(ISGs)的表达,这些基因参与调控病毒限制、抗原呈递和细胞凋亡。其转录可由多种模式识别受体通路触发,如 cGAS–STING、RIG-I/MDA5–MAVS 以及 TLR3–TRIF,并最终汇聚到 IRF3/IRF7 和 NF-κB。IFN-β 信号失调与干扰素病(interferonopathies)和自身免疫性炎症有关,并在病毒感染、肿瘤免疫逃逸以及先天免疫对核酸的感知等研究中被广泛关注。
IFN-β 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 IFNB1 表达。
IFN-β 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在IFNB1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性IFN-β表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 IFNB1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。