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IFN-α/βRα双切口酶质粒(h) | sc-401662-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFN-α/βRα双切口酶质粒(h2) | sc-401662-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFNAR1 编码干扰素 α/β 受体 α 亚基(IFN-α/βRα),它是 I 型干扰素受体的细胞表面亚基之一,可结合 IFN-α 和 IFN-β,从而启动先天免疫信号传导。配体结合后会促进 JAK1/TYK2 激酶及其下游 STAT1/STAT2–IRF9(ISGF3)复合物的激活,驱动干扰素刺激基因的转录,这些基因调控抗病毒防御、抗原呈递以及免疫细胞间的串扰。IFNAR1 的活性还受受体内吞与泛素介导的周转降解影响,从而决定信号强度与持续时间。涉及 IFNAR1 的 I 型干扰素通路失调,在炎症与自身免疫背景以及肿瘤—免疫相互作用和宿主—病原体应答表型等方面均被广泛研究。
IFN-α/βRα 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IFNAR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IFNAR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IFNAR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IFNAR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。