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IFITM3双切口酶质粒(h) | sc-403281-NIC | 20 µg | $410.00 |
IFITM3(干扰素诱导跨膜蛋白3)是一种受干扰素刺激诱导的内体/溶酶体膜蛋白,可通过限制膜融合并调控内吞运输来抑制有包膜病毒进入细胞。其表达受I型/II型干扰素信号通路调控,并参与先天免疫防御程序:在感染过程中重塑膜组成与囊泡动态。IFITM3也与炎症反应相关,并因其对膜结构组织及受体转运的影响而被用于研究免疫细胞信号传导、应激反应及肿瘤生物学中的潜在作用。IFITM3的遗传差异与表达水平差异与病毒感染易感性和严重程度表型的变异有关,支持其在宿主–病原相互作用研究中的重要性。
IFITM3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IFITM3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IFITM3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IFITM3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IFITM3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。