IFI-44 Double Nickaseプラスミド (m): sc-430287-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IFI-44 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IFI-44ダブルニカースプラスミド（m）およびIFI-44ダブルニカースプラスミド（m2）は、Ifi44を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IFI-44 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-430287-NIC | 20 µg | $410.00 |
インターフェロン誘導タンパク質44（IFI-44）は、マウスの Ifi44 遺伝子にコードされるタンパク質で、抗ウイルス応答や炎症応答の過程で、I型インターフェロンシグナル伝達およびパターン認識受容体の活性化の下流で誘導される、インターフェロン刺激遺伝子（ISG）産物です。IFI-44 の発現は、自然免疫活性化の指標（リードアウト）として一般的に用いられ、インターフェロン駆動性の転写ネットワークや宿主による制限機構など、細胞内プログラムの制御に関与することが示されています。感染症や免疫介在性の状況では、IFI-44 の発現異常や関連する ISG シグネチャーが観察されており、インターフェロン経路の生物学、免疫細胞の活性化状態、炎症に関連した分子表現型を研究する上での有用性を支持しています。マウスモデル系では、Ifi44 を操作することで、組織横断的にインターフェロン応答性の機序や下流のエフェクター機能を解析することが可能になります。
IFI-44 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Ifi44 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Ifi44内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Ifi44の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Ifi44が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。