Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IFI-35 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406072
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IFI-35 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IFI-35, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IFI-35 Anticuerpo (B-1): sc-393513
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IFI-35 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406072 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
IFI35 codifica IFI-35, una proteína estimulada por interferón que participa en la señalización inmunitaria innata y en la modulación de la expresión génica inflamatoria. IFI-35 está vinculada a las respuestas de interferón de tipo I y se ha descrito que interactúa con proteínas reguladoras del sistema inmunitario, influyendo en vías posteriores a la activación de receptores de reconocimiento de patrones, como la señalización de receptores tipo RIG-I y de TLR. A través de estas redes, IFI35 contribuye a los programas de defensa antiviral y puede afectar la producción de citocinas, la presentación de antígenos y estados más amplios de activación de las células inmunitarias. La señalización del interferón desregulada y la expresión alterada de IFI35 se han asociado con patología mediada por el sistema inmunitario e interacciones tumor–sistema inmunitario, lo que respalda su relevancia en estudios de inflamación, biología de las infecciones e inmunología del cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFI-35 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IFI35 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IFI35 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IFI35 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFI-35.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IFI35 para la investigación de la señalización de IFI-35, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IFI35 críticos para la función de IFI-35
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IFI35 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IFI-35 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IFI-35 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IFI35. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFI-35 (h) y el plásmido HDR IFI-35 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IFI35 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IFI35 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.