IFI-203 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421032

Descripción general

Ifi203 codifica IFI-203, una proteína murina inducible por interferón implicada en la vigilancia inmunitaria innata y en la regulación de programas génicos inflamatorios. IFI-203 se estudia comúnmente en el contexto de respuestas estimuladas por interferón, donde puede influir en la detección de ácidos nucleicos, el control transcripcional y la señalización de citocinas aguas abajo. La regulación alterada de las vías del interferón es relevante en modelos de autoinmunidad, inflamación crónica e interacciones hospedador–patógeno, lo que convierte a Ifi203 en un locus útil para desentrañar la circuitería inmunitaria intrínseca a la célula. Las perturbaciones de pérdida o ganancia de función de Ifi203 pueden ayudar a definir cómo los programas impulsados por interferón moldean los estados de activación de las células inmunitarias y los fenotipos inflamatorios tisulares en ratones.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFI-203 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifi203 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifi203 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifi203 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFI-203.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifi203 para la investigación de la señalización de IFI-203, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ifi203 críticos para la función de IFI-203
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifi203 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IFI-203 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFI-203 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifi203. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFI-203 (m) y el plásmido HDR IFI-203 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifi203 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifi203 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.