Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IDE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421021
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IDE O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IDE, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IDE Anticorpo (F-9): sc-393887
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IDE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421021 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A enzima degradadora de insulina (IDE) é uma metaloprotease dependente de zinco que medeia a proteólise intracelular e extracelular da insulina e de outros pequenos peptídeos, contribuindo para a renovação desses peptídeos e para a regulação da duração da sinalização. Em tecidos de camundongo, a atividade da IDE interage com a sinalização de insulina/IGF, o tráfego endossomal e as vias de proteostase que moldam a homeostase metabólica e as respostas ao estresse. Alterações na expressão ou na função da IDE têm sido associadas à desregulação do controle da glicose e da depuração de peptídeos, e a IDE é frequentemente investigada em modelos relevantes para fenótipos metabólicos e para o acúmulo de peptídeos associado à neurodegeneração. Como resultado, Ide é um nó genético útil para dissecar como a degradação de peptídeos influencia redes de sinalização celular e a biologia de proteínas propensas à agregação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IDE (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ide em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ide, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ide na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IDE.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ide para a investigação da sinalização de IDE, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ide críticos para a função IDE
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ide para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IDE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IDE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ide. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IDE Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IDE (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ide para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ide definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.